معرفی کیت تشخیص اندوتوکسین لونزا N294-03
کیت تشخیص اندوتوکسین لونزا N294-03 با نام تجاری PYROGENT® Plus Gel Clot LAL Assay یک کیت آزمایشگاهی برای شناسایی اندوتوکسین های باکتریایی به روش ژل کلات (Gel-Clot) است. این محصول توسط شرکت Lonza تولید می شود و برای آزمون اندوتوکسین در نمونه های آزمایشگاهی و کنترل کیفیت محصولات دارویی کاربرد دارد.
این کیت دارای ظرفیت ۲۰۰ تست و حساسیت اسمی 0.03 EU/mL است. روش آزمون بر پایه واکنش لیزات آمیبوسیت لیمولوس (LAL) با اندوتوکسین باکتریایی انجام می شود و نتیجه آن از طریق تشکیل یا عدم تشکیل لخته ژلی بررسی می شود.
نسخه PYROGENT Plus علاوه بر معرف LAL، دارای اندوتوکسین استاندارد کنترل (Control Standard Endotoxin یا CSE) سازگار با معرف است. بنابراین برای انجام کنترل های مورد نیاز آزمون، نیازی به خرید جداگانه این استاندارد نیست.
مشخصات فنی و محتویات کیت N294-03
کیت N294-03 از محصولات سری PYROGENT Plus شرکت لونزا است که برای اجرای آزمون های ژل کلات در آزمایشگاه های کنترل کیفیت طراحی شده است.
- روش آزمون: Gel-Clot LAL Assay
- ظرفیت: ۲۰۰ تست
- حساسیت اسمی: 0.03 EU/mL
- معرف LAL: چهار ویال لیوفیلیزه، هر ویال برای ۵۰ تست
- استاندارد کنترل: یک ویال Control Standard Endotoxin
- نوع نتیجه: کیفی، بر اساس تشکیل یا عدم تشکیل ژل
برای انجام آزمون به لوله های واکنش شیشه ای فاقد پیروژن با ابعاد ۱۰ در ۷۵ میلی متر، آب مخصوص معرف LAL و تجهیزات مناسب انکوباسیون نیاز است. این لوازم باید مطابق دستورالعمل سازنده تهیه و آماده شوند و نباید وجود آنها در بسته اصلی کیت فرض شود.
کاربرد کیت PYROGENT Plus در آزمایشگاه
کیت اندوتوکسین ژل کلات لونزا برای بررسی وجود اندوتوکسین باکتریایی در نمونه هایی استفاده می شود که کنترل آلودگی اندوتوکسینی آنها اهمیت دارد.
مهم ترین کاربردهای این محصول عبارت اند از:
- انجام آزمون اندوتوکسین باکتریایی در آزمایشگاه های کنترل کیفیت دارویی
- بررسی اندوتوکسین در مواد اولیه و نمونه های مورد آزمایش
- کنترل نمونه های آب مورد استفاده در فرایندهای دارویی، پس از تایید مناسب بودن روش برای نمونه
- ارزیابی آلودگی اندوتوکسینی در نمونه های تحقیقاتی سازگار با روش LAL
- انجام آزمون های کنترل مثبت و بررسی تداخل نمونه با استفاده از اندوتوکسین استاندارد
استفاده از این کیت برای هر نوع نمونه مستلزم بررسی سازگاری ماتریس نمونه با روش آزمون است. وجود مواد مهار کننده یا تقویت کننده واکنش LAL ممکن است بر نتیجه تاثیر بگذارد.
نحوه عملکرد روش ژل کلات و تفسیر نتیجه
در روش Gel-Clot، اندوتوکسین باکتریایی در شرایط مناسب باعث فعال شدن واکنش آنزیمی معرف LAL می شود. در نتیجه، لخته ژلی در لوله واکنش تشکیل می شود.
پس از انکوباسیون طبق دستورالعمل سازنده، لوله واکنش به آرامی ۱۸۰ درجه برگردانده می شود. باقی ماندن ژل یکپارچه در لوله به عنوان نتیجه مثبت در نظر گرفته می شود. در مقابل، تشکیل نشدن ژل پایدار نشان دهنده نتیجه منفی در شرایط آزمون است.
حساسیت اسمی 0.03 EU/mL به مشخصات معرف مربوط است و به تنهایی حد تشخیص قطعی اندوتوکسین در تمام نمونه ها محسوب نمی شود. رقت نمونه، حداکثر رقت معتبر (MVD)، تداخل های احتمالی و اعتبارسنجی روش بر تفسیر نتیجه تاثیر دارند.
این آزمون به صورت پایه نتیجه کیفی ارائه می دهد. در صورت اجرای آزمون با رقت های متوالی و روش معتبر، امکان برآورد نیمه کمی اندوتوکسین نیز وجود دارد.
تفاوت کیت N294-03 با N283-125 لونزا
هر دو محصول از سری PYROGENT Plus شرکت Lonza هستند و از روش ژل کلات برای شناسایی اندوتوکسین استفاده می کنند. تفاوت اصلی آنها در تعداد تست و حساسیت اسمی معرف است.
- N294-03: ظرفیت ۲۰۰ تست با حساسیت 0.03 EU/mL
- N283-125: ظرفیت ۶۴ تست با حساسیت 0.125 EU/mL
مدل N294-03 دارای ظرفیت آزمایش بیشتری است و به دلیل حساسیت اسمی پایین تر بر حسب EU/mL، امکان شناسایی غلظت های پایین تری از اندوتوکسین را در شرایط معتبر آزمون فراهم می کند.
انتخاب بین این دو مدل باید بر اساس حد اندوتوکسین مجاز نمونه، رقت مورد نیاز، تعداد آزمون ها و نتایج بررسی تداخل انجام شود. ظرفیت بیشتر به تنهایی به معنای مناسب تر بودن محصول برای تمام آزمایشگاه ها نیست.
شرایط نگهداری و نکات استفاده
اجزای لیوفیلیزه کیت باید پیش از آماده سازی در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد و دور از نور نگهداری شوند. همچنین رعایت تاریخ انقضا و شرایط درج شده در دستورالعمل و گواهی آنالیز هر بچ ضروری است.
معرف LAL پس از آماده سازی، در صورت نیاز به نگهداری کوتاه مدت، تا ۲۴ ساعت در دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد قابل نگهداری است. برای نگهداری طولانی تر باید شرایط انجماد مورد تایید سازنده رعایت شود. از انجماد و ذوب مکرر معرف باید خودداری کرد.
شرایط نگهداری اندوتوکسین استاندارد پس از آماده سازی با شرایط لیزات یکسان نیست و باید مطابق دستورالعمل اختصاصی آن رعایت شود.
تمام ظروف، آب آزمایشگاهی و تجهیزات در تماس با نمونه و معرف باید برای آزمون اندوتوکسین مناسب باشند تا آلودگی ناخواسته یا تداخل در نتیجه ایجاد نشود.
نکات مهم هنگام خرید کیت اندوتوکسین لونزا
هنگام خرید PYROGENT Plus N294-03 باید کد کاتالوگ، ظرفیت ۲۰۰ تستی، حساسیت 0.03 EU/mL و وجود اندوتوکسین استاندارد کنترل در بسته بررسی شود.
همچنین تاریخ انقضا، شرایط حمل و نقل یخچالی و دسترسی به گواهی آنالیز (CoA) بچ محصول اهمیت دارد. انتخاب حساسیت مناسب باید با توجه به الزامات کنترل کیفیت و حد اندوتوکسین مجاز برای نمونه انجام شود.
این محصول برای آزمایشگاه هایی مناسب است که به روش تشخیص اندوتوکسین مبتنی بر تشکیل ژل نیاز دارند. در کاربردهایی که اندازه گیری کمی مستقیم یا ثبت خودکار نتایج ضروری است، باید مناسب بودن روش ژل کلات در مقایسه با سایر روش های سنجش اندوتوکسین بررسی شود.
دیدگاه‌ها
هنوز دیدگاهی ثبت نشده. اولین نفری باشید که نظر می‌دهد.
دیدگاه خود را بنویسید
نشانی ایمیل و موبایل شما منتشر نخواهد شد.