کیت مشتق سازی اسیدهای آمینه واترز کد WAT052880

معرفی کیت مشتق سازی اسیدهای آمینه واترز

کیت مشتق سازی اسیدهای آمینه واترز با نام انگلیسی AccQ-Fluor Reagent Kit و کد WAT052880 یکی از محصولات تخصصی شرکت Waters برای آماده سازی نمونه و آنالیز اسیدهای آمینه است. این کیت در روش AccQ-Tag برای تبدیل اسیدهای آمینه به مشتقات فلورسانس قابل اندازه گیری با کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) استفاده می شود.

بسیاری از اسیدهای آمینه فاقد ویژگی های نوری مناسب برای آشکارسازی مستقیم و حساس هستند. استفاده از معرف مشتق سازی AccQ-Fluor امکان تبدیل آنها به ترکیبات دارای خاصیت فلورسانس را فراهم می کند و به این ترتیب اندازه گیری و تعیین مقدار اسیدهای آمینه در نمونه های مختلف آزمایشگاهی امکان پذیر می شود.

این محصول برای آزمایشگاه های آنالیز پروتئین، مراکز تحقیقاتی زیست دارویی، صنایع غذایی و مجموعه های فعال در بررسی ترکیب اسیدهای آمینه کاربرد دارد. کیت WAT052880 برای مصارف تحقیقاتی طراحی شده و برای استفاده مستقیم در تشخیص بالینی مناسب نیست.

محتویات بسته بندی کیت AccQ-Fluor Reagent Kit

کیت WAT052880 شامل پنج مجموعه از سه معرف اصلی است که در مجموع برای انجام حدود 250 آنالیز شامل نمونه ها، استانداردها و نمونه های شاهد کفایت می کند. اجزای بسته بندی رسمی شرکت Waters عبارت اند از:

• AccQ-Fluor Reagent 1: شامل 5 ویال 6 میلی لیتری بافر بورات که برای ایجاد شرایط pH مناسب در واکنش مشتق سازی استفاده می شود.
• AccQ-Fluor Reagent 2A: شامل 5 ویال 3 میلی گرمی معرف پودری AQC با نام علمی 6-Aminoquinolyl-N-Hydroxysuccinimidyl Carbamate که عامل اصلی مشتق سازی اسیدهای آمینه است.
• AccQ-Fluor Reagent 2B: شامل 5 ویال 4 میلی لیتری حلال استونیتریل که برای حل کردن معرف پودری AQC پیش از انجام واکنش استفاده می شود.

معرف AQC به صورت خشک عرضه می شود تا پایداری آن پیش از مصرف حفظ شود. اجزای این کیت طبق اطلاعات رسمی سازنده به صورت جداگانه قابل سفارش نیستند. مقدار دقیق مصرف هر معرف و روش آماده سازی باید مطابق دستورالعمل Waters تعیین شود.

مکانیسم عملکرد کیت مشتق سازی اسیدهای آمینه

مکانیسم عملکرد AccQ-Fluor بر واکنش معرف AQC با گروه های آمینی اسیدهای آمینه استوار است. در این فرایند، اسیدهای آمینه به مشتقات فلورسانس پایدار تبدیل می شوند که برای جداسازی کروماتوگرافی و آشکارسازی حساس مناسب هستند.

در روش AccQ-Tag، مشتق سازی پیش از ورود نمونه به ستون کروماتوگرافی انجام می شود. سپس مشتقات تشکیل شده با استفاده از کروماتوگرافی مایع فاز معکوس از یکدیگر جدا شده و توسط آشکارساز فلورسانس اندازه گیری می شوند.

در شرایط مرجع این روش، طول موج تحریک فلورسانس برابر با 250 نانومتر و طول موج نشر برابر با 395 نانومتر است. استفاده از این شرایط در کنار ستون و فاز متحرک مناسب، امکان شناسایی و تعیین مقدار اسیدهای آمینه موجود در نمونه را فراهم می کند.

یکی از ویژگی های مهم این کیت، کنترل میزان آلودگی زمینه ای اسیدهای آمینه در معرف ها است. طبق مشخصات تحلیلی Waters، در آزمون بلانک مشتق سازی با شرایط تعیین شده، مقدار هر یک از اسیدهای آمینه هیدرولیزات کمتر از 2 پیکومول و برای سیستئین کمتر از 4 پیکومول گزارش شده است.

کاربردهای کیت Waters WAT052880 در آزمایشگاه

کیت AccQ-Fluor در آزمایشگاه هایی استفاده می شود که نیاز به بررسی دقیق ترکیب و مقدار اسیدهای آمینه در نمونه های شیمیایی و زیستی دارند.

• آنالیز هیدرولیزات پروتئین و پپتید: بررسی ترکیب اسیدهای آمینه حاصل از هیدرولیز پروتئین ها و پپتیدها در مطالعات ساختار و ترکیب پروتئین.
• تحقیقات زیست دارویی: استفاده در بررسی ترکیب اسیدهای آمینه و مشخصه یابی مواد پروتئینی مورد مطالعه در تحقیقات دارویی.
• بررسی محیط کشت سلولی: اندازه گیری اسیدهای آمینه موجود در محیط های کشت برای مطالعات مرتبط با مصرف مواد مغذی و تغییرات ترکیب محیط.
• صنایع غذایی و خوراک دام: بررسی ترکیب اسیدهای آمینه نمونه ها برای مطالعات ارزش تغذیه ای و کنترل کیفیت مواد اولیه.
• آزمایشگاه های دانشگاهی: استفاده در پروژه های تحقیقاتی مرتبط با بیوشیمی، علوم پروتئین و روش های جداسازی کروماتوگرافی.

این کیت مرحله مشتق سازی نمونه را انجام می دهد و به تنهایی یک سیستم کامل آنالیز اسیدهای آمینه نیست. برای جداسازی و اندازه گیری مشتقات به تجهیزات کروماتوگرافی، ستون مناسب، فازهای متحرک و استانداردهای کالیبراسیون مرتبط نیاز است.

شرایط نگهداری و پایداری معرف AccQ-Fluor

بر اساس دستورالعمل رسمی Waters، کیت AccQ-Fluor در صورت باز نشدن بسته بندی می تواند در دمای اتاق تا تاریخ انقضای درج شده روی محصول نگهداری شود. مدت اعتبار اعلام شده برای محصول باز نشده، یک سال از تاریخ تولید است.

پس از حل کردن معرف پودری AQC در حلال مخصوص، محلول آماده شده باید در ظرف کاملا بسته و داخل دسیکاتور حاوی ماده خشک کننده نگهداری شود. مدت نگهداری معرف بازسازی شده در دمای اتاق حداکثر یک هفته است و نباید در یخچال قرار گیرد.

معرف AccQ-Fluor به رطوبت محیط حساس است؛ بنابراین جلوگیری از تماس طولانی با هوای مرطوب و بسته نگه داشتن ظرف اهمیت دارد. مشتقات آماده شده اسیدهای آمینه نیز در صورت بسته بودن کامل ظرف و محافظت در برابر تبخیر، تا یک هفته در دمای اتاق قابل نگهداری هستند.

به دلیل وجود استونیتریل در کیت، هنگام آماده سازی معرف باید اصول ایمنی کار با حلال های آلی قابل اشتعال رعایت شود و اطلاعات برگه ایمنی محصول مورد توجه قرار گیرد.

نکات مهم هنگام خرید کیت AccQ-Fluor واترز

هنگام خرید کیت مشتق سازی اسیدهای آمینه Waters WAT052880، بررسی سازگاری آن با روش آنالیز مورد استفاده اهمیت دارد. این محصول برای روش AccQ-Tag و سیستم های HPLC مناسب با آشکارساز فلورسانس معرفی شده است؛ سازگاری با روش های دیگر باید به صورت مستقل تایید شود.

کیت WAT052880 نباید با مجموعه کامل AccQ-Tag Chemistry Package با کد WAT052875 اشتباه گرفته شود. مجموعه WAT052875 علاوه بر معرف مشتق سازی، اقلام دیگری مانند ستون کروماتوگرافی، استاندارد اسیدهای آمینه و سایر ملزومات روش را در بر می گیرد.

پیش از ثبت سفارش، بررسی کد اصلی محصول، تاریخ انقضا، شماره بچ، وضعیت بسته بندی و گواهی آنالیز توصیه می شود. همچنین باید مشخص شود که آزمایشگاه تجهیزات و مواد مصرفی لازم برای انجام کامل روش آنالیز اسیدهای آمینه را در اختیار دارد.