معرفی کیت سنجش هپارین BIOPHEN Anti-IIa
کیت سنجش هپارین BIOPHEN Anti-IIa با کد 220005 محصول شرکت HYPHEN BioMed فرانسه است که برای اندازه گیری فعالیت ضد فاکتور IIa هپارین به روش رنگ سنجی دو مرحله ای طراحی شده است. این کیت امکان بررسی فعالیت ضد ترومبین هپارین را در پلاسمای انسانی سیتراته و محلول های خالص شده فراهم می کند.
این محصول برای سنجش هپارین معمولی یا تفکیک نشده (UFH) و هپارین با وزن مولکولی پایین (LMWH) کاربرد دارد. روش آزمایش بر پایه مهار فعالیت ترومبین در حضور آنتی ترومبین است و با استفاده از معرف رنگ زا، میزان فعالیت باقی مانده ترومبین اندازه گیری می شود.
کیت BIOPHEN Anti-IIa دارای وضعیت مصرف تحقیقاتی (RUO) است و برای تشخیص بیماری، تصمیم گیری درمانی یا پایش بالینی بیماران تایید نشده است. روش سنجش آن با الزامات مربوط به اندازه گیری فعالیت ضد IIa هپارین در فارماکوپه آمریکا (USP) و فارماکوپه اروپا (EP) مطابقت دارد.
اصول عملکرد کیت BIOPHEN Anti-IIa
این کیت از روش کروموژنیک یا رنگ سنجی دو مرحله ای برای اندازه گیری فعالیت هپارین استفاده می کند. در این روش، میزان مهار فاکتور انعقادی IIa یا ترومبین بررسی می شود.
در مرحله اول، هپارین موجود در نمونه در حضور مقدار مشخصی آنتی ترومبین با ترومبین واکنش می دهد و باعث مهار بخشی از فعالیت آن می شود. در مرحله دوم، ترومبین باقی مانده با سوبسترای رنگ زای اختصاصی واکنش می دهد و ترکیب رنگی قابل اندازه گیری تولید می کند.
شدت رنگ تولید شده در طول موج 405 نانومتر اندازه گیری می شود. هرچه فعالیت هپارین بیشتر باشد، مقدار ترومبین باقی مانده کمتر و شدت رنگ تولید شده پایین تر خواهد بود. مقدار فعالیت هپارین با استفاده از منحنی کالیبراسیون و در مقایسه با استانداردهای مناسب محاسبه می شود.
این روش را می توان با تجهیزات مناسب به صورت دستی یا با دستگاه های خودکار سازگار انجام داد. انتخاب روش اجرایی و شرایط واکنش باید مطابق دستورالعمل سازنده و اعتبارسنجی آزمایشگاه باشد.
ترکیبات و محتویات کیت هپارین Anti-IIa کد 220005
کیت BIOPHEN Anti-IIa از سه معرف اصلی تشکیل شده است که هر یک به صورت دو ویال لیوفیلیزه عرضه می شوند:
- معرف R1: حاوی آنتی ترومبین انسانی (ATIII) برای فراهم کردن شرایط مهار ترومبین توسط هپارین.
- معرف R2: حاوی ترومبین انسانی خالص شده برای بررسی میزان فعالیت ضد IIa هپارین.
- معرف R3: حاوی سوبسترای کروموژنیک اختصاصی ترومبین با شناسه CS-01(38) برای ایجاد واکنش رنگی قابل اندازه گیری.
بسته بندی رسمی سازنده برای کد 220005 شامل دو ویال از هر معرف است که هر ویال با 1 میلی لیتر آب مقطر بازسازی می شود. معرف ها پیش از انجام آزمایش، طبق پروتکل با بافر مناسب رقیق می شوند و در صورت استفاده از تمام محتویات یک ویال، حجم نهایی محلول کاری می تواند به 5 میلی لیتر برسد. به همین دلیل، بسته بندی این محصول در برخی فهرست های فروش به صورت 2 × 5 میلی لیتر معرفی شده است.
بافرهای اختصاصی، کالیبراتورها و کنترل های مورد نیاز آزمایش جزو محتویات اصلی این کیت نیستند و باید به صورت جداگانه تهیه شوند.
کاربردهای آزمایشگاهی و تحقیقاتی کیت
کیت هپارین Anti-IIa در آزمایشگاه های تخصصی انعقاد خون، مراکز تحقیقاتی و آزمایشگاه های کنترل کیفیت دارویی برای بررسی فعالیت ضد ترومبین هپارین استفاده می شود.
- اندازه گیری فعالیت ضد فاکتور IIa هپارین تفکیک نشده (UFH).
- بررسی فعالیت ضد ترومبین هپارین با وزن مولکولی پایین (LMWH).
- سنجش فعالیت هپارین در پلاسمای انسانی سیتراته و محلول های خالص شده.
- استفاده در مطالعات تحقیقاتی مربوط به ترکیبات ضد انعقاد و عملکرد هپارین.
- بررسی فعالیت ضد IIa فرآورده های حاوی هپارین در آزمایشگاه های کنترل کیفیت، با رعایت روش معتبر آزمون.
- انجام سنجش های مرتبط با روش های فارماکوپه ای USP و EP برای تعیین فعالیت هپارین.
آزمون Anti-IIa با آزمون Anti-Xa تفاوت دارد. روش Anti-IIa بر مهار ترومبین تمرکز می کند، در حالی که روش Anti-Xa میزان مهار فاکتور فعال شده X را اندازه گیری می کند. انتخاب روش مناسب به نوع هپارین، هدف آزمایش و الزامات روش کنترل کیفیت بستگی دارد.
شرایط آماده سازی و نگهداری کیت
معرف های باز نشده کیت BIOPHEN Anti-IIa باید در بسته بندی اصلی و در دمای 2 تا 8 درجه سانتی گراد نگهداری شوند. در صورت رعایت این شرایط، معرف ها تا تاریخ انقضای درج شده روی بسته قابل استفاده هستند.
برای آماده سازی، محتویات هر ویال با 1 میلی لیتر آب مقطر بازسازی می شود. پس از حل شدن کامل، محلول باید طبق دستورالعمل سازنده در دمای محیط به مدت 30 دقیقه پایدار شود. سپس رقیق سازی لازم با بافر اختصاصی متناسب با نوع هپارین انجام می شود.
معرف های بازسازی شده R1، R2 و R3 در صورت جلوگیری از آلودگی و تبخیر و نگهداری در ظرف بسته، تا 15 روز در دمای 2 تا 8 درجه سانتی گراد یا 4 روز در دمای 18 تا 25 درجه سانتی گراد پایداری دارند. همچنین امکان نگهداری آنها تا 6 ماه در دمای منفی 20 درجه سانتی گراد یا پایین تر وجود دارد، مشروط بر اینکه فقط یک بار ذوب شوند و بلافاصله مصرف شوند.
پایداری معرف های رقیق شده باید در شرایط کاری آزمایشگاه بررسی شود. در صورت مشاهده تغییر رنگ غیرعادی، آلودگی یا تغییر ظاهر معرف، از مصرف آن خودداری کنید.
نکات مهم هنگام خرید کیت BIOPHEN Anti-IIa
پیش از خرید کیت سنجش هپارین HYPHEN BioMed کد 220005، لازم است نوع نمونه، هدف آزمایش و سازگاری روش با تجهیزات موجود در آزمایشگاه بررسی شود.
برای انجام آزمون به دستگاه اسپکتروفتومتر یا آنالایزر مناسب آزمایش های کروموژنیک، تجهیزات اندازه گیری حجم، بافرهای اختصاصی و کالیبراتورها و کنترل های متناسب با نوع هپارین نیاز است.
همچنین باید کد رسمی محصول 220005، تعداد ویال ها، تاریخ انقضا و شرایط نگهداری بررسی شود. این محصول را نباید با کیت BIOPHEN Anti-Xa با کد 221005 یا کیت BIOPHEN Heparin Anti-IIa Kinetics با کد 221020 یکسان در نظر گرفت؛ زیرا روش و کاربرد آنها متفاوت است.
این کیت یک مجموعه معرف آزمایشگاهی برای سنجش فعالیت هپارین است و نه ماده هپارین خالص یا رفرنس استاندارد دارویی. برای دستیابی به نتایج معتبر، استفاده از کالیبراسیون مناسب، کنترل کیفیت و رعایت دستورالعمل رسمی سازنده ضروری است.
دیدگاه‌ها
هنوز دیدگاهی ثبت نشده. اولین نفری باشید که نظر می‌دهد.
دیدگاه خود را بنویسید
نشانی ایمیل و موبایل شما منتشر نخواهد شد.