معرفی ستون HPLC بونداپک C18 واترز
ستون HPLC بونداپک C18 واترز با نام انگلیسی µBondapak C18 Column و کد WAT027324 یکی از ستون های کروماتوگرافی مایع شرکت Waters است که برای جداسازی ترکیبات شیمیایی با استفاده از روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (HPLC) در حالت فاز معکوس طراحی شده است.
این ستون از ذرات سیلیکای اصلاح شده با گروه های اکتادسیل (C18) تشکیل شده و برای جداسازی طیف گسترده ای از ترکیبات آلی، به ویژه مولکول های کوچک با ویژگی های آب گریز، مورد استفاده قرار می گیرد. ساختار فاز ساکن C18 امکان ایجاد برهمکنش های آب گریز میان ترکیبات نمونه و سطح ستون را فراهم می کند.
ستون Waters WAT027324 دارای طول 300 میلی متر، قطر داخلی 3.9 میلی متر و اندازه ذرات 10 میکرومتر است. همچنین اندازه منافذ سیلیکا در این ستون 125 آنگستروم بوده و در دسته ستون های تحلیلی HPLC با طبقه بندی USP L1 قرار می گیرد.
ستون های خانواده µBondapak از محصولات شناخته شده شرکت Waters در کروماتوگرافی فاز معکوس هستند. ویژگی انتخاب پذیری این خانواده حاصل ترکیب برهمکنش های آب گریزی و فعالیت گروه های سیلانول موجود در سطح سیلیکا است.
مشخصات فنی و ساختار ستون WAT027324
ستون µBondapak C18 از ذرات سیلیکای با شکل نامنظم تشکیل شده است که سطح آنها با گروه های C18 اصلاح شده است. این ساختار امکان نگهداری ترکیبات بر اساس میزان برهمکنش آنها با فاز ساکن و فاز متحرک را فراهم می کند.
مشخصات فنی اصلی این ستون عبارت اند از:
- نوع فاز ساکن: C18 یا اکتادسیل سیلیکا
- روش جداسازی: کروماتوگرافی مایع فاز معکوس
- طول ستون: 300 میلی متر
- قطر داخلی: 3.9 میلی متر
- اندازه ذرات: 10 میکرومتر
- اندازه منافذ: 125 آنگستروم
- شکل ذرات: نامنظم (Irregular)
- محدوده pH مجاز: 2 تا 8
- حداکثر فشار اعلام شده: 6000 psi معادل 415 بار
- میزان کربن: 10 درصد
- نوع اصلاح سطح: Endcapped
- طبقه بندی USP: L1
وجود گروه های C18 موجب افزایش نگهداری ترکیبات آب گریز می شود. همچنین فعالیت نسبتا بالای گروه های سیلانول در این ستون می تواند بر انتخاب پذیری و رفتار نگهداری برخی ترکیبات بازی در مقایسه با ترکیبات خنثی تاثیر بگذارد.
طول 300 میلی متری ستون می تواند در روش هایی که به مسیر جداسازی طولانی تری نیاز دارند مفید باشد. با این حال، زمان آنالیز، فشار عملیاتی و میزان تفکیک نهایی به ترکیب فاز متحرک، دبی جریان، دما و ماهیت نمونه نیز بستگی دارد.
مکانیسم جداسازی در ستون Bondapak C18
اساس عملکرد ستون Bondapak C18 بر کروماتوگرافی فاز معکوس استوار است. در این روش، فاز ساکن ماهیت آب گریز دارد و فاز متحرک معمولا از ترکیب آب و حلال آلی مناسب مانند متانول یا استونیتریل تشکیل می شود.
پس از تزریق نمونه، ترکیبات مختلف بر اساس میزان تمایل به فاز ساکن و فاز متحرک با سرعت های متفاوت در طول ستون حرکت می کنند. ترکیباتی که برهمکنش آب گریز قوی تری با فاز C18 دارند، در شرایط یکسان معمولا زمان نگهداری بیشتری نشان می دهند.
تغییر درصد حلال آلی در فاز متحرک می تواند بر زمان نگهداری و تفکیک پیک ها تاثیر بگذارد. همچنین در مورد ترکیبات یونیزه شونده، انتخاب pH مناسب در محدوده مجاز ستون اهمیت دارد.
اندازه ذرات 10 میکرومتر این محصول با ستون های جدیدتر دارای ذرات کوچک تر متفاوت است. بنابراین هنگام انتقال یک روش کروماتوگرافی از ستون دیگر به µBondapak C18 باید تفاوت در کارایی جداسازی، فشار سیستم و انتخاب پذیری مورد بررسی قرار گیرد.
کاربردهای ستون HPLC واترز WAT027324
این ستون برای جداسازی و بررسی ترکیبات شیمیایی در روش های کروماتوگرافی مایع فاز معکوس کاربرد دارد و می تواند در آزمایشگاه های تحقیقاتی، دارویی و شیمی تجزیه مورد استفاده قرار گیرد.
- آنالیز ترکیبات دارویی: جداسازی مواد موثره دارویی و ترکیبات مرتبط در روش های HPLC که استفاده از فاز C18 با مشخصات این ستون برای آنها مناسب است.
- کنترل کیفیت آزمایشگاهی: بررسی ترکیب نمونه ها، شناسایی پیک های کروماتوگرافی و تعیین مقدار اجزای نمونه در روش های اعتبارسنجی شده.
- تحقیقات شیمی تجزیه: توسعه و بررسی روش های جداسازی ترکیبات آلی با استفاده از کروماتوگرافی فاز معکوس.
- مطالعات ترکیبات آلی: بررسی نمونه های حاوی ترکیبات با قطبیت و ویژگی های آب گریزی متفاوت، متناسب با انتخاب پذیری ستون.
- روش های فارماکوپه ای: استفاده در روش هایی که به ستون با طبقه بندی USP L1 نیاز دارند، مشروط به تایید شرایط روش و آزمون تطابق سیستم.
طبقه بندی USP L1 به معنای تعلق ستون به گروه مشخصی از فازهای ساکن C18 است و به تنهایی تضمین نمی کند که این ستون بدون تغییر یا ارزیابی مجدد، جایگزین هر ستون L1 دیگری باشد.
شرایط نگهداری و مراقبت از ستون µBondapak C18
برای نگهداری صحیح ستون WAT027324 باید از خشک شدن بستر سیلیکا و باقی ماندن رسوبات یا ترکیبات ناسازگار در داخل ستون جلوگیری شود.
طبق دستورالعمل شرکت Waters، حلال مناسب برای نگهداری طولانی مدت ستون µBondapak C18 متانول 100 درصد است. هنگام خارج کردن ستون از دستگاه، درپوش های دو انتهای آن باید به صورت کامل بسته شوند تا از تبخیر حلال و خشک شدن بستر جلوگیری شود.
اگر فاز متحرک مورد استفاده دارای نمک های بافری باشد، لازم است پیش از انتقال ستون به متانول، نمک ها با شستشوی مناسب و حلال سازگار از ستون خارج شوند. باقی ماندن نمک ها و سپس تماس با حلال آلی می تواند موجب رسوب و افزایش فشار شود.
برای افزایش عمر مفید ستون، استفاده از نمونه ها و فازهای متحرک تمیز و فیلتر شده، جلوگیری از ورود ذرات معلق و رعایت محدوده pH و فشار مجاز اهمیت دارد. همچنین استفاده از گارد ستون سازگار می تواند به کاهش آلودگی ورودی ستون اصلی کمک کند.
نکات مهم هنگام خرید ستون بونداپک C18 واترز
هنگام خرید ستون کروماتوگرافی Waters WAT027324 باید ابعاد، اندازه ذرات، نوع فاز ساکن و مشخصات روش آنالیزی بررسی شوند. این محصول یک ستون تحلیلی با قطر داخلی 3.9 میلی متر و طول 300 میلی متر است و نباید با سایر ستون های µBondapak دارای ابعاد متفاوت اشتباه گرفته شود.
برای مثال، ستون WAT086684 از همین خانواده دارای ابعاد 3.9 در 150 میلی متر است و ستون WAT044370 با قطر داخلی 4.6 میلی متر و طول 150 میلی متر عرضه می شود. این محصولات از نظر مشخصات هندسی متفاوت هستند و نباید بدون بررسی روش به عنوان جایگزین مستقیم WAT027324 انتخاب شوند.
همچنین نسخه WAT027324RF دارای برچسب الکترونیکی eConnect است و از نظر قابلیت ردیابی دیجیتال با نسخه معمولی تفاوت دارد. بنابراین در زمان سفارش باید کد دقیق مورد نیاز آزمایشگاه مشخص شود.
بررسی اصالت محصول، شماره سریال، مشخصات اتصالات، گواهی عملکرد ستون و سازگاری با سیستم HPLC موجود از موارد مهم پیش از خرید است. انتخاب صحیح ستون می تواند در تکرارپذیری نتایج، حفظ شکل مناسب پیک ها و اجرای قابل اعتماد روش کروماتوگرافی موثر باشد.
دیدگاه‌ها
هنوز دیدگاهی ثبت نشده. اولین نفری باشید که نظر می‌دهد.
دیدگاه خود را بنویسید
نشانی ایمیل و موبایل شما منتشر نخواهد شد.